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液相色譜檢測(cè)時(shí)，對(duì)照品為什么會(huì)“隱身”？這是一個(gè)常見(jiàn)且令人困擾的問(wèn)題。以下從對(duì)照品、色譜條件、儀器、色譜柱四個(gè)方面為您詳細(xì)剖析原因及解決方案：

一、對(duì)照品問(wèn)題
原因一：對(duì)照品未溶解或溶解不完全
解決方案：選擇合適的溶劑溶解對(duì)照品，或添加助溶劑（DMSO 或 DMF），確保對(duì)照品溶液澄清透明。

原因二：對(duì)照品配制濃度過(guò)低
解決方案：配制更高濃度的對(duì)照品溶液進(jìn)行測(cè)試（注意不要超過(guò)柱容量）或增大進(jìn)樣量。

原因三：對(duì)照品降解
解決方案：根據(jù)對(duì)照品性質(zhì)選擇合適的儲(chǔ)存條件或根據(jù)廠家說(shuō)明書(shū)保存（如避光、避氧、低溫、干燥）。

二、色譜條件問(wèn)題
原因一：檢測(cè)波長(zhǎng)（檢測(cè)器）選擇不當(dāng)，對(duì)照品在該波長(zhǎng)下無(wú)紫外吸收或有較弱吸收。
解決方案：根據(jù)對(duì)照品結(jié)構(gòu)式及其紫外吸收特征選擇合適的檢測(cè)波長(zhǎng)（如無(wú)紫外吸收的化合物可選擇蒸發(fā)光散射檢測(cè)器）。

解決方案：調(diào)整流動(dòng)相組成或比例，使其具有適當(dāng)?shù)谋Ａ裟芰Γㄈ缣岣哂袡C(jī)相比例以增強(qiáng)洗脫能力，使保留時(shí)間提前）。

三、儀器問(wèn)題
原因一：進(jìn)樣針堵塞、進(jìn)樣閥故障或進(jìn)樣操作不當(dāng)?shù)葘?dǎo)致樣品未進(jìn)入系統(tǒng)或進(jìn)樣量不足
解決方案：檢查并沖洗進(jìn)樣針，檢查進(jìn)樣閥密封性；同時(shí)確認(rèn)操作的正確性。

原因二：流路異常，如某流路進(jìn)入氣泡，導(dǎo)致流速不穩(wěn)定或不泵液，從而不出峰。
解決方案：隨時(shí)觀察系統(tǒng)壓力的穩(wěn)定性，如壓力不穩(wěn)定需進(jìn)行排查維修

原因三：檢測(cè)器未開(kāi)啟或檢測(cè)器故障，如檢測(cè)器的部件損壞、光路堵塞等會(huì)導(dǎo)致無(wú)法檢測(cè)到信號(hào)。
解決方案：對(duì)檢測(cè)器進(jìn)行檢查和維修?？梢酝ㄟ^(guò)檢測(cè)過(guò)往檢測(cè)正常的其他樣品輔助判斷。

四、色譜柱問(wèn)題
原因一：色譜柱不適用，色譜柱類(lèi)型與對(duì)照品性質(zhì)不匹配，導(dǎo)致樣品無(wú)法在柱內(nèi)保留或分離。如使用反相色譜柱分析強(qiáng)極性化合物，從而不保留快速流出色譜柱。
解決方案：根據(jù)對(duì)照品性質(zhì)選擇色譜柱，對(duì)于強(qiáng)極性或離子型化合物，可選擇親水相互作用色譜柱（HILIC）或離子交換色譜柱等。

原因二：色譜柱失效或者堵塞。色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不使用或正常損耗都可能導(dǎo)致柱效下降，對(duì)照品進(jìn)入后可能在柱頭積累無(wú)法洗脫流出。
解決方案：對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗和維護(hù)，并測(cè)試柱效。如果柱效下降嚴(yán)重，可考慮更換色譜柱。